實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>吉林某研究院用含待測(cè)水樣(野外采集含重金屬水樣)的培養(yǎng)液對(duì)斑馬魚胚胎進(jìn)行培養(yǎng),用冷凍研磨儀對(duì)培養(yǎng)后的斑馬魚進(jìn)行研磨,提取其體內(nèi)核酸和蛋白質(zhì)與凈水培養(yǎng)的斑馬魚進(jìn)行對(duì)比,探究其基因表達(dá)差異,進(jìn)行重金屬毒性檢測(cè)評(píng)估。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:冷凍研磨儀一臺(tái),2ml*24不銹鋼適配器一個(gè)、2ml塑料研磨管若干,以及實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組斑馬魚各20條。
斑馬魚樣品前處理實(shí)驗(yàn)研磨的操作步驟:
1.將20只斑馬魚魚苗加入2ml塑料離心管,放入研磨珠,加入PBS緩沖液。
2.打開機(jī)器并設(shè)置功率和時(shí)間,溫度設(shè)置到 -50°C,研磨次數(shù)1次。
3.將研磨管放入研磨儀適配器中,適配器固定到研磨儀中,關(guān)閉研磨儀蓋,開始運(yùn)行。
4.結(jié)束后打開儀器取出研磨管,可進(jìn)行后續(xù)核酸和蛋白的提取。
斑馬魚樣品前處理實(shí)驗(yàn)研磨效果圖:
冷凍研磨儀在處理斑馬魚樣品時(shí)具有以下優(yōu)勢(shì):
1. 保護(hù)生物活性:在低溫條件下研磨,能夠有效保護(hù)斑馬魚體內(nèi)易失活的生物大分子,核酸、蛋白質(zhì)、酶等,最大程度地維持其生物活性。
2. 防止氧化:重金屬可以誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng),使斑馬魚體內(nèi)氧化物和抗氧化酶含量增多。低溫減少了樣本中易氧化成分的變質(zhì),保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3. 降低污染風(fēng)險(xiǎn):獨(dú)立的研磨管,避免了樣本間的交叉污染,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。
4. 高效破碎:采用三維一體8字形研磨方式,快速高效率地破碎斑馬魚組織和細(xì)胞,使細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)充分釋放,提高后續(xù)實(shí)驗(yàn)的提取效率。
冷凍研磨儀JXFSTPRP-CLN是一種快速、高效、制冷的研磨系統(tǒng)。它能在非常短的時(shí)間內(nèi)將毛發(fā)、土壤、植物和動(dòng)物的組織/器官、細(xì)菌、酵母、真菌、孢子、古生物標(biāo)本等樣品完成研磨、粉碎、混合機(jī)細(xì)胞破壁。
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